جولیانا مارگولیس (/ˈmɑːrɡjʊliːs/؛ زادهٔ ۸ ژوئن ۱۹۶۶) بازیگر و نویسنده آمریکایی است. پس از چند نقش تلویزیونی کوچک، مارگولیس برای نقش اصلی خود در نقش کارول هاتاوی در سریال درام پزشکی طولانی مدت ER (2009-1994) NBC به شهرت رسید، که برای آن جایزه Primetime Emmy را دریافت کرد. او همچنین صداپیشگی Neera در فیلم ماجراجویی دایناسور (2000) را بر عهده داشت و در مینی سریال The Mists of Avalon (2001) ظاهر شد.
در سال 2009، او نقش اول آلیسیا فلوریک را در درام حقوقی CBS The Good Wife (2009-2016) ایفا کرد. بازی او مورد تحسین قرار گرفت و برنده دو جایزه Primetime Emmy برای بهترین بازیگر نقش اول زن در یک سریال درام، یک جایزه گلدن گلوب و یک جایزه انجمن منتقدان تلویزیون شد.
از فیلمهای او میتوان به Evelyn (2002)، Ghost Ship (2002)، Snakes on a Plane (2006)، City Island (2009)، Stand Up Guys (2012)، و The Upside (2017) اشاره کرد. مارگولیس همچنین در سریال کمدی سیاه AMC Dietland (2018) و مینی سریال نشنال جئوگرافیک The Hot Zone (2019) نقش آفرینی کرد. در سال 2021، او نقش اصلی را در فصل دوم سریال درام Apple TV + The Morning Show داشت.
مارگولیس برنده هشت جایزه انجمن بازیگر سینما شده است، که او را تبدیل به دومین زن پر جایزه در SAG بعد از جولیا لوئیس-دریفوس، یک جایزه گلدن گلوب و سه جایزه Primetime Emmy کرده است. در سال 2015، مجله تایم او را به عنوان یکی از 100 فرد تأثیرگذار در جهان معرفی کرد.مارگولیس همچنین یک ستاره در پیاده روی مشاهیر هالیوود دریافت کرده است.